在-196℃的液氮中,胚胎的代谢几乎处于静止状态。只要解冻后胚胎质量合格,就能移植进母体。需要提醒的是,冷冻时间越短,胚胎质量越好。不过冷冻胚胎的保存年限没有严格的限制,欧洲曾有冻存5年以上胚胎解冻成功妊娠的报道。
胚胎解冻时,工作人员把“沉睡”多日的胚胎取出之后,放进特殊的解冻液里。这个解冻液能够让胚胎的“体温”在一两秒之内迅速上升到37℃。20分钟以后,胚胎就完全“苏醒”了。经过处理后,就可将挑选出的优质胚胎送回子宫,使之在人体内继续发育。
冷冻卵子复苏
取卵
女性取卵前,需要服用促排卵药物,使多个卵泡提前发育,利用穿刺技术从而排出多个卵子,这样才可一次性获得多个卵子。
保存
卵子从妇女体内通过手术取出后,首先要在冷冻保护剂里进行预处理,其主要目的是使卵子脱水。充分脱水后进行冷冻,目前国内外主要采用下列2种冷冻方法,一为程序化冷冻,即在程序冷冻仪的特定设定下降温和冷冻,后置于液氮中保存;另一种为超高速的玻璃化冷冻,卵子在冷冻保护剂里进行预处理后,用极快的速度直接将卵子置于液氮中冷冻保存。
解冻(复苏)
当本来处于冷冻阶段的卵子需要受孕的时候,就要进行解冻阶段,这个解冻复苏的过程需要快速进行,一般是直接将卵子从液氮中取出至室温状态,使用保护剂。在复苏后存活的卵子,可以采用IVF或卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术进行体外受精,然后进行胚胎移植。
冷冻精子复苏
临床上将通过自慰射出的精液收集,取少量做抽样检查后,剩下的加入保护剂,超低温(零下100多℃)冷冻起来。需要使用的时候,将储存精子的样品管于室温下浸在自来水或双蒸水中或仅仅暴露于空气之中(两者均在室温下22℃左右进行)进行解冻。
加入保护剂,可防止精子细胞内水分结冰后,体积增大撑破细胞膜。在解冻过程中,有部分精子细胞会死亡,原因很多,如精子细胞内冰晶融化时,胞内液体会和胞外保存液发生交换,如果进入细胞内的液体过多、过快,会破坏精子细胞。
但是复苏后剩下的精子,如果活力良好,足够进行辅助生育技术。理论上,一个受精卵只需要一个精子,如果健康精子数量过少,可以选用显微注射法,将精子一个一个注入到卵细胞中。